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RNAlong RNA长期保存液 XY93113

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保存条件:4℃。

产品介绍:

RNA性质不稳定,极易降解。溶解于无RNase的TE 或水中的纯化RNA,即便是储存于-20 ºC也难免降解。

为解决这一问题,可以将RNA沉淀或RNA溶液溶解于RNA 长期保存液中,允许RNA 4ºC保存或-20ºC至少保存

1年而免于降解。RNA长期保存液是RNA样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收

RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。

注意事项:

1. RNA 长期保存液可能抑制逆转录酶活性,做 RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀 RNA。

2. 在 RNA 长期保存液中的 RNA 的终浓度不应该超过 4μg /μl。

用 RNA 长期保存液溶解 RNA 沉淀:

1. 对固体 RNA 沉淀,每 0.4-4μg RNA 沉淀加入 1μl RNA 长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡 15-30 min 溶解沉淀。干燥的 RNA 沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后 50ºC 加热 10-15 min。最好先用小体积无 RNase 的

TE 或水溶解 RNA 沉淀,然后按液态 RNA 操作。

2. 对液态 RNA 溶液,每 0.4-4μg RNA 溶液加入 1μl RNA 长期保存液,混匀。注意混合液中 RNA 长期保存液

的体积百分比不低于 80%。

3. 测定 OD 值。注意加入相应量的 RNA 长期保存液做空白。

4. 将溶解的 RNA 样品储存于-20 ºC 或者-70 ºC。

从 RNA 长期保存液中沉淀 RNA:

1. 估计 RNA 溶液终体积。加入 4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小,可加入 RNase free water 稀

释 RNA 溶液,如果溶液中 RNA 含量低于 0.25μg /μl,可加入 5M NaCl(RNase free) 至终浓度 0.2M,混匀后再加

入 4 倍体积乙醇。

2. 室温放置 5 min。

3. 12,000rpm 离心 5 min,弃上清,风干,溶解。

4. 重新沉淀的 RNA 溶解后可用于 RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。

直接使用 RNA 长期保存液中的 RNA:

直接吸取 RNA 长期保存液中的 RNA,进行普通或甲醛变性电泳和 Northern Blot。进行甲醛变性电泳时,

最后上样的样品中的 RNA 长期保存液的浓度可高达 50%。

附:甲醛变性电泳样品准备: 临用前,混合水(87μl),甲醛(81μl),50%甘油/含 0.25 mg/ml 溴芬兰(48μl ) 和

20X MOPS (24μl). 将上述混合液和 RNA 长期保存液中的 RNA 样品等体积混合,55 ºC 温育 10 min,按照标准

的甲醛变性电泳过程上样。


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