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活细菌/死细菌染色试剂盒(N01/PI双染,绿色/红色荧光) XY-41266-1

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试剂盒组成:

组份 A:N01 染色液 A 100 μl 

组份 B:PI 染色液 B 200 μl*2

各组分存储条件:

染色液 A -20℃避光保存;

染色液 B 2-8℃避光保存;

1、 染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。

2、 染色液 A 为 DMSO 溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。

3、 可以用手捂住使其融解或 37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

4、 试剂拆封后请尽快使用完!

有效期: 一年。

    1) 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。

    2)试剂拆封后请尽快使用完!

产品简介:

    1) 活细菌/死细菌染色试剂盒是采用 N01/PI 绿色-红色荧光探针双染细菌的方法染色活细菌和死细菌。

    2) 细菌细胞活性取决于其代谢特征或膜完整性。但是依赖于代谢特征的检测方法通常只适用于部分细胞类型。评估细胞膜完整性的方法具有更高的灵敏度和更普遍的适用性。

    3) 活细菌/死细菌染色试剂盒利用细菌细胞膜的完整性差异,可以可靠地进行染色并在几分钟内定量区分活细菌和死细菌。

    4) 本试剂盒中的 N01 活细菌染色探针为绿色荧光标记的活细菌探针,能透过活细菌的完整结构的质膜,具有 500 / 525nm 的最大激发/发射波长。膜受损的死细菌染色探针为 PI,是一种红色荧光核酸染色剂,只能穿透膜受损的死细菌。具有完整细胞膜的细菌将被荧光染料染成明亮的绿色,而膜受损的细菌表现出较少的绿色荧光,会发出较强的红色荧光。

    5) 当膜通透性的绿色荧光探针 N01 进入细菌后,跟细菌的核酸结合。染色探针 N01 在进入细胞膜之前荧光较弱,当与活细菌的 DNA 结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。单独使用 N01 染料时可以染色所有细菌,包括膜结构完整的细菌和膜受损的细菌。

    6) 红色核染色染 PI 不能穿过活细菌的完整细胞膜,它仅穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞,并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光(激发:488,545nm,发射:617 nm),因此 PI 仅对膜受损的死细胞染色。

    7) 根据以上特点, N01 和 PI 可以被结合用来作为活细菌和死细菌的双重染色。由于 N01-DNA 和 PI-

    DNA 都可被 488 nm 激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。 

    8)本试剂盒是利用活死细菌的膜通透性改变进行的检测,适用于荧光显微镜和流式细胞仪。本测定原理适用于大多数细菌类型,包括各种革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。细菌活力的常见标准是细菌在合适的营养培养基中繁殖的能力生长测定,使用本试剂盒产生的结果与液体或固体培养基中的生长检测相关性良好。但是需要注意,不同于动物细胞,在一定的条件下,具有损伤膜的细菌可能能够恢复和繁殖,这种细菌可以在本试剂盒的测定中被检测为“死 亡”。相反,一些膜完整的细菌可能无法在营养培养基中繁殖,然而这些细菌可能被记为在这个测定中被检测为“活着”。如果在该测定法和细菌之间观察到相当大的差异,应该考虑这些可能性。

    9) 以每个样本 100 μl 染色液计,本试剂盒小包装可以染色 500 个样本。

    10)  N01 除了最简单的细菌核荧光标记外,还可以用于荧光成像,微孔板分析和流式细在合适的滤光器下,这种 DNA 结合染料与其他颜色的荧光染料一起可用于活细菌的多种颜色分析。

    

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