产品介绍：

红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞

和灭活细胞 RNA 酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA 在高离序盐状态下选择性吸

附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液

将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的 RNase free H2O 将 RNA 从硅基质膜上洗

脱。

自备试剂：乙醇，β-巯基乙醇

注意事项：

1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打

钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

2.需要自备一次性注射器。

3.裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮

肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4.关于DNA的微量残留：

由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数

RT-PCR 扩增过程中极其微量的 DNA 残留（一般电泳 EB 染色紫外灯下观察不可见）

影响不是很大，如果要进行严格的 mRNA 表达量分析如荧光定量 PCR，我们建议在进

行模板和引物的选择时：

⑴选用跨内含子的引物，这样 DNA 就不能作为模板参与扩增反应。

⑵选择基因组 DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。

5.RNA 纯度及浓度检测：

完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件：胶浓度 1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲

液；150V，15 min)检测完整性。由于细胞中 70%-80%的 RNA 为 rRNA，电泳后 UV

下应能看到非常明显的 rRNA 条带。动物 rRNA 大小分别约为 5 kb 和 2 kb，分别相当

于 28S 和 18S rRNA。动物 RNA 样品中最大 rRNA 亮度应为次大 rRNA 亮度的 1.5-2.0

倍，否则表示 RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的 RNA，OD260/OD280 读数（10 mMTris, pH7.5）在 1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的 pH 值

影响。同一个 RNA 样品，假定在 10 mM Tris，pH7.5 溶液中测出的 OD260/OD280 读数

1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在 1.5-1.9 之间，但这并不表示 RNA 不纯。

浓度：取一定量的 RNA 提取物，用 RNase-free 水稀释 n 倍，用 RNase-free 水将分光

光度计调零，取稀释液进行 OD260，OD280测定，按照以下公式进行 RNA 浓度的计算：

终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数 n)×40