核酸银染试剂盒

中文名:核酸银染试剂盒

英文名:Nucleic Acid Silver Stain Kit

CAS:N/A级别:N/A

分子量:N/A分子式:N/A

纯度:N/A储存条件:2-8℃

产品简介

保存条件：常温保存，保质期1年。

产品内容：

产品说明：

  分子生物学实验中，常利用银染的方法显示聚丙烯酰胺凝胶或者琼脂糖凝胶中的核酸条带，其检测原理是：银离子(Ag+）可与核酸形成稳定的复合物，随后Ag+ 在碱性环境下被还原剂如甲醛还原成银颗粒，后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍，常用于检测SSR标记、SNP标记等。

一 准备工作

1.  核酸PAGE银染试剂盒共可配制染色液和显色液分别1L/5L。根据操作步骤估算所需染色液和显色液体积。染色液和显色液均需按以下比例新鲜配置。

2.  染色液配置比例：（100mL染色液）

100mL染色液=1mL 染色试剂A+10mL 染色试剂B+10mL无水乙醇+79mL去离子水。

3. 显色液配置比例：（100mL显色液）

100mL显色液=0.5mL显色试剂C+10mL显色试剂D+89.5mL去离子水。

二 操作步骤（预览操作步骤，估算工作液使用量，新鲜配置工作液之后开始染色步骤）

1.  PAGE电泳结束后，将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中，漂洗，共2次，2min/次。

2.  将PAGE胶转移到适当体积的染色液中，使染色液在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色（40-60 rpm）10min。

3.  倒掉染色液，用去离子水快速漂洗2次，每次30秒。

4.  将PAGE胶转移到适当体积的显色液中，使显色液在轻柔摇晃过程中能够淹

没PAGE胶。室温摇晃（40-60 rpm）直到颜色显现，一般需要10min左右。

5.  将PAGE胶置于适当背景下照相。

三 注意事项

1.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.  银染主要出现在PAGE胶的表面，因此该方法更适合用于薄胶（0.5-0.75mm）的检测。

3.  水质对银染影响很大，最好用双蒸水或去离子水。

4.  装胶的器皿清晰干净，双蒸水多冲洗几遍。

5.  操作时戴手套，不然胶上会有大手印。

6.  跑胶时建议采用大梳子，小样本量。因为银染分辨率就很高，小梳子的条带比较模糊，样本量太大时杂带太浓。

7.  显色后尽快照相。凝胶随着时间逐渐变黄，条带越来越浓，杂带逐渐显现。时间拖得越久，片子越难看。