全血基因组DNA快速提取试剂盒 (小量、含蛋白酶K)
产品概述
本试剂盒适用于快速提取全血基因组DNA,可在30 min内完成单个或多个样本的提取工作。基于独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗、离心的步骤,进一步将蛋白、多糖、多酚以及细胞代谢物等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大,因此产量的个体差异也可能非常大。
不同样本提取DNA的大致产量与纯度如下:
样本类型 | 样本量 | DNA平均产量 | 纯度 (OD260/OD280) |
哺乳动物全血 | 100-500 μL | 3-10 μg | 1.7-1.9 |
500-1000 μL | 4-30 μg | 1.7-1.9 | |
禽类、两栖类全血 | 5-20 μL | 5-40 μg | 1.7-1.9 |
注:根据血液样品中白细胞数量和保存条件的差异,DNA产量也会有所差异。
注意事项
请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项
◇所有离心操作步骤,均在室温(15-25℃)下进行。
◇结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
◇ 结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
◇ 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。
◇ 第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
◇ 为了最佳效果,最好使用新鲜血液标本或者4℃存放少于3天的标本,不要使用反复冻融超过3次的标本,否则会严重降低产量。开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
◇关于平衡液的使用:取一个新的硅胶膜吸附柱装在收集管中,吸取100 μL的平衡液至柱中。12,000 rpm(13,400×g)离心1 min,倒掉收集管中废液,将吸附柱重新放回收集管。此时平衡液预处理柱完毕。接后续的操作步骤。平衡液在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。