酵母高纯质粒小量快速提取试剂盒（含Lytic Enzyme）

产品概述

本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，并结合Lytic Enzyme特异消化酵母细胞壁，能在1 h内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后，加入破壁酶去除细胞壁，然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

推荐使用量及产量：通常酵母质粒拷贝数都很低，一般通过电泳或者分光光度计都很难检测到。提取的质粒如果用于下游试验时通常建议使用量为：1-5 μL用做PCR模板，5-10 μL用于转化大肠杆菌，选择商业化的高效率的感受态细胞。

注意事项

请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项

◇ 所有离心操作步骤，均在室温（15-25℃）下进行。

◇ 环境温度低时溶液YP2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。

◇ 溶液YP3和去蛋白液PE中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

◇ Lytic Enzyme为蜗牛酶甘油储液，因此比较粘稠，请小心取用，-20℃保存。蜗牛酶是从蜗牛的嗦囊和消化道中制备的混合酶，它含有纤维素酶，果胶酶，淀粉酶，蛋白酶等20多种酶。适合破碎溶解各种酵母的细胞壁。

◇ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧瓶盖。

◇ 首次使用前请先在漂洗液WB瓶和去蛋白液PE瓶中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入！

◇ 将溶液YP3放在冰上预冷。

◇ 吸取使用量的Sorbitol buffer加入0.1% β-巯基乙醇，恢复到室温备用。

◇ 关于平衡液的使用：取一个新的硅胶膜吸附柱装在收集管中，吸取100 μL的平衡液至柱中。12,000 rpm离心1 min，倒掉收集管中废液，将吸附柱重新放回收集管，备用。平衡液在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。