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Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsNase) XY9D0401

Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsNase)

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Golden 1st cDNA Synthesis Kit(with dsNase)

描述:

本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系 5×GoldenRT MasterMix 进行 RNA 的反转录反应,使用时只需加入模板、引物和 RNase Free H2O 即可,大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。MasterMix 中添加了 HL dsDNase(热敏双链特异性核酸酶),该双链特异性核酸酶(又名 gDNA Remover)可在反转录的过程中,直接降解去除 RNA 中残留的基因组 DNA 污染(可去除100ng 基因组 DNA),从而在定量 PCR 的检测中无需考虑基因组污染的干扰,设计的定量 PCR 引物也无需进行横跨外显子。

该试剂盒尤其适用于定量 PCR 检测。该预混体系包含点突变致 RNase H 活性缺失的Golden MLV Reverse Transcriptase 反转录酶、dNTP、反应 Buffer、HL dsDNase 和 RNase Inhibitor。该试剂盒采用的反转录酶去除了 RNase H 活性,从而避免反转录过程中降解 RNA。同时经过突变文库筛选,使得其热稳定性更强,可耐受 55℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应,采用高温反转录可显著打开 RNA 二级结构,从而提高复杂 RNA模板的扩增性能、提高反转录 cDNA 的长度和产量,从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链 cDNA 可广泛用于 2ndStrand 的合成、杂交、PCR 扩增、Real-Time PCR 反应等。

应用:(1)该制品可有效反转录 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA(2)该制品不可反转录 microRNA、病毒 DNA/RNA 样品

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储存:请置于-20°C,可保存 3 年;避免反复冻融。 

注:如 5×Golden RT MasterMix (with dsDNase)出现沉淀属正常现象,可用手捂化,混合均匀后使用不影响实验结果。

1. 按以下组分配制反转录反应液

2022040804104377413

*注:反转录引物可根据需要改用特异性引物。 

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2.根据实际情况反转录可选择快速程序或标准程序

注:通常在定量 PCR 实验中使用快速程序进行反转录(反转录效率>80%),在进行高 GC 含量、含复杂二级结构、长片段的模板转录时采用标准程序(反转录效率>100%)。

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