SUMO 蛋白酶

描述：

SUMO蛋白酶，也称为UIP蛋白酶，是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶，来源于酵母编码的MIP1基因，其特异性识别UBL蛋白的三级结构－SUMO（Small Ubiquitin-Like Modifier）。SUMO蛋白酶能够识别完整的SUMO序列，并依赖正确的蛋白质构象，仅有完整的序列，没有正确的结构，SUMO酶是不能对目标蛋白进行切割的。因此，该酶是目前切割特异性最好的蛋白酶，可在较广泛的作用温度和PH范围（pH7-9）内发挥作用，切割的最佳温度为30°C。SUMO蛋白酶的识别序列如下，切割位点位于QIGG之后
SDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLRFLYDGIRIQADQTPEDLDMEDNDIIEAHREQIGG
本公司生产的SUMO蛋白酶含有双His标签，酶切后，可通过Ni-NTA Resin亲和纯化，很容易地将SUMO去除。双His标签保证了，SUMO蛋白酶高亲和力的结合Ni-NTA，以最大限度的去除SUMO蛋白酶。该SUMO蛋白酶分子量约26kD，比活>10E5/mg。

单位定义

在1XSUMO Protease Buffer-Salt (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% Igepal, 1 mM DTT)中，30°C反应1h，剪切>85％的2 μg对照底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

应用

融合蛋白标签剪切去除。

储存

SUMO蛋白酶置于-70°C可保存2年；-20°C可保存6个月，避免反复冻融；10×SUMO Buffer置于-20°C保存即可。

操作方法

若蛋白为热不稳定性，请在 4°C 孵育较长时间或增加酶的用量。 

1. 在 EP 管中配制如下反应体系

2. 混匀上述体系后于 30°C 孵育，在 1、2、4、6 小时分别吸出 30 μl 上述反应液，置于单独的 EP 管中。 

3. 向上述 EP 管中加入 20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20°C。 

4. 取 30 μl 样品进行 SDA-PAGE 分析。

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