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柱式冻存血液DNA提取试剂盒(柱式冻存血液DNAout) XY90033ZL

Pillar cryopreserved blood DNA extraction kit (pillar cryopreserved blood DNAout)

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柱式冻存血液DNA提取试剂盒(柱式冻存血液DNAout)

产品及特点 血液 DNA 是重要的研究材料,但是血液 DNA 在常温下存放的时间很短,因此很多血液样品都是冻凝存放。由于冻存过程中形成的冰晶会刺破细胞膜,释放出DNA,因此从冻存血液中高效提取 DNA 一直是个棘手的问题。本产品就是开发的专门用于从冻存血液中提取 DNA 的试剂盒,它具有下列特点:
1. 适用于各种动物血液,包括禽类和昆虫。
2. 微量提取,每次可处理 400 μL 血液。
3. DNA 完整性好,纯化后长度在 20-50 Kb 之间。
4. DNA 纯净,OD260/OD280 在 1.8-2.0 之间,可直接用于 PCR、酶切、杂交等实验。DNA 产量一般在 10 μg/mL 血液。

5. 操作简单,整个过程约 20 分钟,室温操作,适合大规模样品处理。

规格及成分

 

运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。

自备试剂 氯仿

使用方法

1. 从-20℃或更低的冰箱中取出血液样品,室温下静置融化。
2. 将 400 μL 解冻的血液转移到一个 1.5 mL 的塑料离心管中,加入 400 μL 溶液 A,充分震荡混匀。如果是禽类血液,则少加 10 倍,只加 40 μL。

3. 在混合液中加入 400 μL 溶液 B 和 200 μL 氯仿(自备),振荡 1 分钟。由于离心管比较满,所以需要确保管底溶液转动起来,否则只是液面振动而已。4. 4℃12000 g 离心 10 分钟,小心将上清转移至一新的 1.5 mL 塑料离心管中。

注意:最好不要室温离心,如果室温离心,则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚,只能得到很少的上清。
5. 将约 0.7-0.8 mL 上清转移到 10-15 mL 塑料离心管中(不要使用玻璃离心管,否则 DNA 会吸附到管壁上。常用的培养提质粒用的细菌的培养管即可)。
6. 加入 2.5 倍上清体积的溶液 C(2 mL),立即摇晃混匀。
7. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次 0.7 mL 左右,转移后静置 2-5 分钟,以使 DNA 与膜充分结合,然后室温 12000 g 离心 30 秒,弃收集管中的废液,然后再加入 0.7 mL,重复上述操作,直到全部混合液挂柱。
8. 在离心吸附柱中加入 0.7 mL 通用洗柱液,室温 12000 g 离心 30 秒,弃收集管中的废液。
9. 在离心吸附柱中再加入 0.3 mL 通用洗柱液,室温 12000 g 离心 30 秒,弃收集管中的废液。
10.室温 12000 g 离心 30 秒,去尽残留液体(此步骤十分重要,不要省略,否则残留的含乙醇的通用洗柱液将抑制后续的酶反应)。
11.将离心吸附柱置于一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 50 μL DNA 洗脱液 2.0,室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液 2.0 在 65℃预热后再使用,洗脱 DNA的效果更佳。
12.室温 12000 g 离心 30 秒,离心管底部溶液即 DNA 溶液,可立即使用或-20℃长期保存。
13.本产品所用离心吸附柱吸附能力比较强,如果再次用 DNA 洗脱液 2.0 洗脱,还能洗脱下一些血液 DNA。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

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