TdT末端转移酶
描述:
末端转移酶(TdT)是一种不依赖于模板的 DNA 聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到 DNA 分子的 3’羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链 DNA 分子均可作为 TdT 的底物,加尾长度可达 5~300nt。此酶分子量为 58.3 kDa,无5’和 3’核酸外切酶活性。该酶广泛用于 DNA 的 3’末端添加同聚物、利用修饰碱基(如 ddNTP,DIGdUTP)标记 DNA3’末端、TdT 介导的 dUTP 缺口末端标记技术(细胞凋亡的原位检测)等试验。该酶经检测无 DNA 内切酶和外切酶污染,不含 RNase。
活性定义:37 ℃ 60 分钟内,催化 1nmol dNTP 加入到多聚核苷酸 3’羟基末端中所需的酶量定义为 1 个活性单位
热失活:75°C 20min。
储存:-20℃可保存 3 年。
反应实例
1.配制反应体系
37°C 孵育 30min。
2. 75°C 20min 失活。
注意事项
1、适量 EDTA 可使 Terminal Transferase 的活性丧失。
2、金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、氯离子、碘例子和磷酸根离子均对 Terminal Transferase 活性具有抑制作用。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。