钙盐染色液(改良茜素红S法)
产品简介:
钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在,一种是离子钙,存在血液循环内,即所谓血钙;另一种是结合钙,和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。除骨骼和牙齿外,正常时钙渗透在所有组织和细胞中,一般不以固体状态出现在组织内,但在某些情况下钙析出成固体并沉着于组织内,则为病理性钙盐沉着,沉着的钙盐主要是磷酸钙,其次为碳酸钙。钙盐通常是单折射的,但草酸钙是双折射的,当使用HE染色时钙一般呈紫蓝色。许多染料可以于钙形成螯合物,包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。一般来说这些染料在识别中至大量的钙时,效果优于轻微染色的微量钙沉积,但茜素红S往往对少量的沉积物可得到更可靠的结果。
钙盐染色常用方法有硝酸 银法和茜素红S法,本染色液采用改良McGee-Russell法,用茜素红S和Mayer苏木素染色,尤其适用于少量钙盐组织的染色。
自备材料:
1、10%中性福尔马林固定液
2、自来水
3、显微镜
操作步骤(仅供参考):
一、常规染色
1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水包埋。
2、切片厚5μm,常规脱蜡至水。
3、切片用茜素红S染色液滴染1~5min(见注意事项1),稍水洗。
4、McGee-Russell分化液迅速分化数秒。
5、Mayer苏木素染色液浅染胞核1~2min,流水冲洗10min。
6、常规脱水透明,中性树胶封固。
二、不溶性钙染色
1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水,其中注意在95%乙醇中脱水应充分。
2、塑料包埋,室温过夜,37℃烤箱中聚合2~4天,-20℃冰箱冷却15~20min。
3、切片厚度3~5μm,未脱钙骨切片脱塑至水,蒸馏水洗。
4、切片入茜素红S染色液1~10min(见注意事项2),蒸馏水洗。
5、(备选)McGee-Russell分化液迅速分化数秒。
6、(备选)Mayer苏木素染色液浅染胞核1~2min,流水冲洗10min。
7、常规脱水透明,中性树胶封固。
注意事项:
1、茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定,可在显微镜下观察见钙盐呈较深的橙红色即取出水洗,如染色时间过长就出现弥散现象,一般1~2min即可。
2、在不溶性钙染色中,茜素红S的染色时间要根据钙盐的含量来确定,在病理性钙化及骨化的病理诊断及科研中常使用该法,如骨折的修复、骨化性肌炎、陈旧性瘢痕组织固化等。
3、McGee-Russell分化和Mayer苏木素染色不是必须步骤。
4、经过茜素红S染色液染色后,钙沉积物是双折射的。
5、茜素红S法在辨别和检测少量钙时特别有用,如检查肾中的异常钙化(尿钙过多)。
有效期: 12个月有效。常温运输,4℃保存。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。