RAPA3G Probe qPCR MasterMix (with UDG)

描述：

RAPA3G Probe qPCR MasterMix 将热启动 RAPA3GDNA 聚合酶、反应 Buffer、dNTP 染料等试剂预混在一起，是一种 2×浓度的单组分预混试剂。该制品不含有 ROX 校正染料，适用于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量 PCR机型。优化的反应缓冲液，使得该制品可用于单重及多重的探针法定量 PCR。 

制品中的 RAPA3G DNA 聚合酶为第三代 DNA 聚合酶，其具有最高的杂质耐受性，其对乙醇、胍盐、肝素、血清、植物多糖多酚具有极高的耐受性，因此可用于粗样品的直接定量 PCR 检测(Direct PCR)。该酶经化学法修饰，在 50℃以下 100%无活性，只有 95 度条件下加热 5min 后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性 PCR 扩增，极大的提高了 PCR 扩增特异性。 

由于 RAPA3G DNA 聚合酶对 dUTP 具有极强的识别能力，该制品中的 dTTP 核酸碱基完全被 dUTP 所取代，因此扩增产物均包含 dUTP，在配合热敏 UDG（该酶在 95℃热变性 5min 后不可逆失活，不影响后续 PCR 反应）的条件下能达到最佳的防污染能力。在 10e5 copies 污染物的测试条件下，Ct 推迟 15 个以上（污染去除能力>99.997%）。

包装

储存：-20℃可保存 2 年。短期使用可放置 2-8℃，保存 3 个月。如出现白色沉淀溶解后使用，不影响反应性能。该试剂经 30 次冻融后性能无下降，因此不使用时请置于-20℃避光保存。

操作方法 

1、按照如下组分配制 20 μl PCR 反应体系：

2. 进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：

3. 在多数情况下，采用两步法程序可获得理想的扩增效果，在无法达到预期理想效果的情况下，也可采用三步法 PCR程序，程序如下：

4. 反应结束后确认 Real-Time PCR 的扩增曲线和标准曲线。R Gre 

注意：消化污染步骤中的温度设置可在 25-37℃之间均可，无显著差异，但高于 42℃以上的温度会导致热敏 UDG 消化能力急剧下降。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。