TGIRT-III Reverse Transcriptase

描述：

TGIRT-III RTnase 具有依赖于 DNA/RNA 杂交链的反转录酶活性，能快速合成 cDNA，该酶具有强的链转换活性（Switch）。因此该酶可用于 tRNA、ncRNA、miRNA 等核酸分子的同步逆转录和加接头（TGIRT template-switchingreaction，用于 TGIRT-Seq）。TGIRT-III RTnase 具有极强的延伸性能，因此更易获得全长的 cDNA。除此外，该酶具有的强 switch 活性，使得可以利用 RNA 的 5’端帽结构进行SMART 建库（SAMRT-Seq）。该酶的反应温度为 37-60°C，最佳反应温度为 50°C。

应用

链特异性转录组分析

全细胞或无细胞转录组测序

非编码 RNA 转录组测序

RIP-seq, HITS-CLIP, irCLIP and CRAC

通过高通量测序鉴定 RNA 碱基修饰

RNA 结构映射

长 cDNA 的合成

全基因组或靶向 RNA 结构分析

储存：-20°C 可保存 3 年。

典型的 TGIRI-Seq 反应

室温孵育 30min 后，加入 2.5 μl 的 10mM dNTP 后，于37-60°C（推荐温度为 50°C）条件下反应 5-60min（通常15min）。 

失活：反应结束后，向反应体系中加入 1μl 的 5N NaOH，并置于 95°C 下加热 3min，失活该酶。失活后加入 5N HCl中和高碱性条件。

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