T4 RNA连接酶2
描述:
T4 RNA 连接酶 2,截短型 KQ(T4 Rnl2tr KQ)能特异性将 5’末端预腺苷化的DNA或 RNA连接到RNA的 3’ OH末端。反应无需 ATP,但需预腺苷化接头。T4 Rnl2tr KQ 是 T4 RNA 连接酶 2,截短型的双点突变体。K227 和 R55 的双突变降低了赖氨酰腺苷化,并提高了酶的连接活性,使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平相当。连接反应的背景被降为最低是因为:不再使用 ATP,而改用预腺苷化接头,同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性。该酶可用于二代测序 small RNA 的文库构建。
储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:1 单位指 37℃条件下,30 分钟内完成 1nmol 的单链 ssDNA 所需要的酶量。
使用注意事项
(1)1×T4 RNA Ligase Buffer:50mM Tris-HCl pH 7.5,10mM MgCl2,1mM DTT。该酶反应时不需要 ATP。
(2)最佳反应温度 37℃,65℃ 10min 可使该酶失活。
(3)该酶的连接接头需要 5’-预腺苷化。不能连接磷酸化底物。
(4)该酶不能连接双链 DNA 或 RNA。
(5)加入终浓度 5~10% PEG 8000 可提高连接效率。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。