ssDNA/RNA环化连接酶

描述：

ssDNA/RNA CircLigase 为热稳定的 DNA/RNA 连接酶，不依赖于 ATP，可催化单链 DNA 或单链 RNA 的环化，也可催化其分子间连接，但其对单链 DNA 的连接效率更高。环化反应中，要求催化底物单链 DNA/RNA 具有 5’-磷酸基团和 3’-OH 基团。对于大于 15nt 的单链底物，该酶都能高效的连接。该酶还可催化 DNA 或 RNA 分子与预腺苷化的 DNA接头之间的连接，另外，在 ATP 过量的情况下，该酶可使DNA/RNA 分子腺苷化。

活性定义：60°C 1h 条件下，催化 1pmol 5’-磷酸化参照 Oligo(55mer)完全环化所需的酶量定义为 1U。 

储存：-20℃可保存 3 年。

2. PAGE 胶检测

反应产物于 20%丙烯酰胺/8M 尿素变性凝胶电泳后，选择合适方法染色，观察环化或连接产物情况。未环化的底物或腺苷化的底物可用 Exonuclease I 酶进行消化。

使用注意事项：

(1) ssRNA 的连接不需要加入 MnCl2。

(2)实验来看，加入 20μM 终浓度的 ATP 可提高连接效率约25%。

(3)加入 0.4~0.8M Betain 可提高含有二级结构的单链核酸连接效率。

(4)连接底物必须是磷酸化或腺苷化产物。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。