热稳定腺苷化DNA/RNA连接酶

描述：

5’AppDNA/RNA 热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是 RNA 连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶催化的连接不依赖于ATP，但需要 5’预腺苷化的接头才能将其连接到 RNA 或单链 DNA 的 3’OH 末端。该酶也可催化 3’端被 2’-O-甲基化的RNA 和 5’预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。即使在 ATP 存在的情况下，该连接酶也不能使 RNA 或单链 DNA 的 5’端磷酸发生腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。该酶为热稳定型，最佳反应温度为65℃，此温度下降低了 RNA 的二级结构，大大提高连接效率。

应用：

二代测序文库构建中连接单链 DNA 和腺苷化的 DNA 接头。构建小 RNA 二代测序文库，可在较高温度下连接预腺苷化的接头和 RNA。

储存：-20℃可保存 3 年。

使用注意事项

（1）1×AppDNA/RNA Ligase Buffer：10 mMBis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10 mM MgCl2,1mM DTT。

（2）该酶只能连接 5’-端预腺苷化的 Oligo 接头到单链 DNA或 RNA 的 3’-OH 基团。

（3）当腺苷化底物的 5’-端第一个碱基为“C”时，连接效率较差。

2. 65°C 孵育 1h。 

3. 95°C 3min，终止反应。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。