9N 2.0 DNA连接酶
描述:
9N 2.0 DNA 连接酶(又名 9°N DNA Ligase)能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯 键 相 连 。 该 酶 来源于 极 度 耐 热 的 海 底 超 嗜 热 古 菌(Thermococcus sp.)9°N 菌株中克隆的连接酶基因,在45℃-90℃ 范围内均有活性。该酶进一步经基因工程基因突变,使得耐受更高的温度,在 90℃孵育 15min 仍然保留 50%以上的活性,因此其适用于:(1)高温条件下,连接 DNA链上的切刻位点;(2)与 PCR 反应条件兼容可用连接酶检测反应;(2)连接酶链式反应,对等位基因进行特异性检测。
储存:-20℃可保存 2 年。
活性定义:1 单位指 50μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的 1μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。
1X 9N DNA 连接酶反应缓冲液
10 mM Tris-HCl,600μM ATP,2.5 mM MgCl2,2.5 mM
DTT,0.1% Triton X-100(pH 7.5 @ 25℃),45℃ 温育。
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