UNG (Uracil N-Glycosylase)
描述:
尿嘧啶 DNA 糖基酶(Uracil N-Glycosylase,UNG)又名 Uracil-DNA Glycosylase, UDG, 来源于 E. coliuracil N-glycosylase 基因的重组表达,分子量为 26kDa。其可催化含尿嘧啶的单链和双链 DNA 释放游离尿嘧啶。它对 RNA 无活性,主要应用于 PCR 扩增产物的防污染。它的作用原理基于:如果在 PCR 反应中以 dUTP 替代dTTP掺入DNA 中,形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物,该酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 基的糖苷键,降解该 PCR 扩增产物。
活性定义:在标准 PCR 反应体系下,37℃条件下,1 小时降解 1µg 含 dU 碱基的单链 DNA 的酶量为 1 活性单位。
反应 Buffer:UNG与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。
酶储存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, , 50%Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
储存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反复冻融。
热失活:95°C,5min。
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