Lambda核酸外切酶
描述:
Lambda 核酸外切酶作用于双链 DNA,沿 5´→3´方向逐步切去 5´单核苷酸。最适底物是 5´磷酸化的双链DNA,也能缓慢降解单链 DNA 和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA 的切刻或缺口处起始消化。
储存:-20℃可保存 3 年。活性定义:1 单位指在 50 μl 反应体系中,37℃条件下,30分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 10 nmol 酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。使用注意事项(1)1×Lambda Exo Buffer:67 mM Glycine-KOH(pH 9.4@ 25℃),2.5 mM MgCl2,50 μg/ml BSA,37℃温育。(2)该酶的最佳反应温度为 37°C,75°C 10min 可失活。(3)5´-0H 端的切割速度比 5´-PO4端慢 20 倍,单链 DNA 比双链 DNA 慢 100 倍。操作方法:1.配置反应体系如下:
2. 37℃反应 30min 。
3. 75℃ 10min 进行热失活。
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