大肠杆菌HB101化学感受态细胞

产品及特点 HB101 菌株是 E.coli K12 菌株与 E.coli B 菌株的杂合产物（同时也是 Stbl3 的 原始菌株）。recA13 突变可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率； 但不含核酸酶 endA1 突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂 盒中去蛋白液。hsdS20 背景使 HB101 缺失内切酶系统，增强了外源 DNA 的稳定性 和提取质量。本产品是采用大肠杆菌 HB101 特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于 DNA 的化学转化。本产品具有以下特点：

1. 具有链霉素抗性。

2. 基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR) glnV44λ-。

3. 不存在 lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。

4. 该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验。

规格及成分

运输及保存 干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂 目的 DNA、SOC 或 LB 培养基等

使用方法

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以 根据实际情况分装使用。 以下实验以 50 μL 感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时，向感受态细胞悬液中加入目的 DNA（根据实 际情况加入适量的 DNA，通常 100 μL 感受态细胞能够被 1 ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 25 分钟。

3. 42℃热击 45 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟，晃动会降低转 化效率。

4. 每个离心管中加入 450 μL 无菌的 SOC 或 LB 培养基（不含抗生素），混匀后置 于 37℃摇床，200 rpm 振荡培养 60 分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的 SOC 或 LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于 37℃倒置培养 12-16 小时。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。