大肠杆菌JM109感受态细胞
产品及特点
本产品是采用大肠杆菌 JM109 菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于 DNA 的化学转化。本试剂盒具有下列特点:
1. 使用 pUC19 质粒检测,转化效率可达 108,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1 和 endA1 突变阻止对克隆 DNA 的修饰或对宿主菌染色 DNA 的重组,提高纯化 质粒的产量和质量。
3. JM109 菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB) [F’ traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ] 4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。
规格及成分
运输及保存 干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
使用方法
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100μl,可以根据 实际情况分装使用。 以下实验以 50 μl 感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的 DNA(根据实际情况加入适量 的 DNA,通常 100 μl 感受态细胞能够被 1 ng 超螺旋质粒 DNA 所饱和),用移液器 轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
3. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
4. 每个离心管中加入 450 μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床,150 rpm 振荡培养 45 分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的 SOC 或 LB 固体 琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于 37℃直至液体被吸收, 倒置培养,37℃培养 12-16 小时。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。