非酶DNA清除剂-2
产品及特点
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。基因开发的非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。
2.本身不含RNase污染,因为本产品为非酶产品;而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。
3.快速,只需要十多分钟。
4.稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5.性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。6.能用于小RNA 中DNA污染的去除。
规格及成分运输及保存常温运输、4℃保存,有效期一年。
自备试剂氯仿、75%乙醇
使用方法
1.将总RNA溶液与溶液A按1:1的比例混合(即100 uL RNA溶液需加100uL DNA Erasol-2),充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如钠离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA溶液的量不足100uL,最好加无RNase水补足到10OuL以便后续操作,如果体积大于100 uL,试剂的用量也需要按比例增加。
2.加入相当于RNA溶液和DNA Erasol-2混合液总体积1/2的自备氯仿,充分震荡半分钟。
3.12000-15000 g室温或4℃离心1-3分钟。
4.转移上清到一个RNase-free的塑料离心管中,加2倍体积的溶液B(用前摇匀),充分震荡半分钟。
5. 12000-15000 g室温或4℃离心10分钟后,小心弃上清。如果处理的样品中含有小RNA,最好使用30分钟的离心时间。
6. 加1 mL自备75%乙醇,充分震荡半分钟。
7.12000-15000 g室温或4℃离心5分钟后小心弃上清。
8.短暂快速离心,小心吸弃余液。
9.加入自备RNase-free水溶解RNA沉淀后立即使用或放-80℃长期保存。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。