PLP固定液(Nakane-McLean固定液)
产品及特点 PLP 固定液即过碘酸钠-赖氨酸-多聚甲醛固定液(Periodate–Lysine -Paraformaldehyde Fixative),又可称为 Nakane-McLean 固定液。该固定液 的作用机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基,通过赖氨酸的双价氨基与 醛基结合,从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是由蛋白质和糖两部分构 成,抗原决定簇位于蛋白部分,故该固定液有选择性地使糖类固定,这样既稳定了 抗原,又不影响其在组织中的位置关系。本产品具有下列特点:
1. 较适于富含糖类的组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。
2. 即开即用,用户不需单独购买各种试剂来配制。
3. 固定时间一般需要 12-24 小时。
4. 本产品仅供科研使用。
规格及成分
运输及保存 常温运输,避光保存,保存期一年。
自备试剂 20%甘油或 0.1 M PBS 溶液
使用方法 一、配制 PLP 固定液(以配制 50 mL 固定液工作液为例,如果用户需要配制其他 体积,请按比例增加或减少各成分的用量)
1. 取 30 mL PLP 固定液溶液 A 加入到 50 mL 的聚乙烯离心管中。
2. 继续向离心管中加入 10 mL 的 PLP 固定液溶液 B,混合均匀。
3. 称取 0.085 g PLP 固定液成分 C 干粉,加入到上步得到得混合液中,搅拌直 至干粉溶解,即得到 PLP 固定液工作液。 注:此固定液最好临用前配制,否则时间长了会产生一些沉淀,亦会发生氧化 反应,从而影响后续组织固定实验。
二、固定液的使用(以皮肤活组织切片为例)
4. 取皮肤活组织,切成小长方块。
5. 置入 PLP 固定液工作液中,固定 12-24 小时(根据样品材料、大小不同,固 定时间或固定温度可能会有较大差异)。
6. 用 0.1 M 自备的 PBS 溶液漂洗固定后的组织样品。
7. 将样品置于自备的 20%甘油或 0.1 M PBS 溶液中,4℃下保存过夜。
8. 将上述样品转移至-20℃下保存备用(20%甘油或 0.1 M PBS 溶液应淹没组 织样品,以防组织样品暴露在液面外被冻伤),或用冷冻的滑动式切片机将固 定后的组织样品切成薄片,光镜或电镜下观察组织。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。