一管式病毒DNA-RNA双提试剂盒(一管式病毒DNA-RNAout)
产品及特点 本产品是基因整合一管式病毒 DNAOUT和一管式病毒 RNAOUT两产品而 得,专门用于从血清(血浆)等液体样品中同时提取病毒 DNA (如 HBV DNA)和病 毒 RNA (如 HCV RNA 和 HIV RNA)的产品。本产品具有下列特点:
1. 回收率高,可以达到 90%以上,高于绝大部分基于离心柱的提取方法。可以 跟 QIAGEN 的同类产品媲美。
2. 灵敏度高,通过 PCR 检测到病毒 DNA 的最终灵敏度可以达到 30 拷贝/mL 样品,通过 RT-PCR 检测到病毒 RNA 的最终灵敏度可以达到 50 拷贝/mL 样品。
3. 一管式操作,减少了样品污染的可能。
4. 一站式套装,除样品外客户不需要准备任何试剂,降低了实验误差。
5. 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
6. 处理量大,如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样 品。
7. 与 PCR、荧光 PCR、RT-PCR、荧光 RT-PCR 等后续反应兼容。
规格及成分:
运输及保存 常温运输和保存,但一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 长期保存(一月以上)最 好放 4℃,有效期一年。溶液 B 和溶液 C 具有挥发性,使用后需要将瓶盖拧紧。
自备试剂 无 使用方法
1. 将 0.1-0.2 mL 液体样品转移到 1.5 mL 旋盖离心管中。如果需要富集样品 中的病毒,可以先将 1.5 mL 液体样品转移到 1.5 mL 旋盖离心管中,然后 4℃ 24,000 g 离心 60 分钟,移弃 1.3 mL 上清液后继续操作下一步的操作。
2. 加入 0.6 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A,盖上盖子后振荡 3-5 秒. 注 意: 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 A 用前需 37℃-65℃水浴融化并充分摇 匀后方可使用。
3. 室温静置 10 分钟。
4. 加入 0.6 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 B,盖上盖子后振荡 3-5 秒。
5. 15,000 g 室温离心 15 分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记 以区别离心面和向心面。
6. 小心移弃上清。注意不要触及管底的 DNA 和 RNA 沉淀。
7. 加入 1.0 mL 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C,振荡数秒后 15,000 g 室 温离心 5 分钟。注意:将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
8. 移弃上清,注意不要触及管底的 DNA 和 RNA 沉淀。
9. 短暂离心数秒, 注意:将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10. 小心移弃残留上清(残留的一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 C 会影响后续反 应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入 100-200 μl 一管式病毒 DNA-RNAout 溶液 D,用移液枪仔细吹打离 心管管底和管壁的膜状沉淀,使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常 现象。不要离心只取上清使用,因为不溶沉淀物中含有 DNA 和 RNA,必须 取混合液使用(哪怕很浑浊)。
12. 直接取适量样品用于 PCR 或 RT-PCR,也可短期保存于-20℃或-80℃。 注:病毒提取的核酸量远不足以电泳检测,提取后可通过 PCR 检测,最终 灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
使用效果
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。