一管式病毒DNA提取试剂盒（一管式病毒DNAout）

产品及特点 本产品是专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取病毒(如 HBV)DNA 的产品， 其原理是异硫氰酸胍/LiCl 溶液即能裂解病毒，又能沉淀 DNA。本产品灵敏度高， 稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床 PCR 检测试剂盒中。

1. 回收率高，可以达到 90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。

2. 灵敏度高，通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。

3. 一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。

4. 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。

5. 处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样品。

6. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。

7. 本产品只能用于科研，不能用于临床。

规格及成分：

运输及保存 常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂 异丙醇，70%乙醇

使用方法

1. 在 1.5 mL 螺旋盖塑料离心管(不要使用压盖式塑料离心管)中加入 0.2 mL 液 体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等）。 1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入 0.2mL 自备生理盐水中挤压出液体，然后取 0.2mL 进行 DNA 提取。 1.2、 如果是粪便等半固定样品，则取约 0.3mL 的样品，加入 0,3 自备生理 盐水，震荡重悬，离心取 0.2mL 上清进行 DNA 提取。 1.3、 如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直 接取用，但后者提取的 DNA 中有细胞的基因组 DNA。 1.4、 如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离 心，用 0.2mL 上清液（含病毒）进行 DNA 提取，但此种情况下最后 得到的 DNA 不可避免的会含有基因组 DNA。 1.5、 如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的 液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心 60 分钟, 移弃 1.3 mL、用剩下的 0.2mL 继续操作。

2. 在 0.2mL 样品中加入 0.6mL DNA 病毒裂解液，振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟。

3. 振荡 30 秒混匀后加入 0.7 mL 自备的异丙醇，振荡 30 秒混匀后，15,000 g 室温离心 15 分钟。

4. 移弃上清，注意不要触及管底的 DNA 沉淀，加入 1.0 mL 70%乙醇，振荡数 秒后 15,000 g 室温离心 5 分钟。

5. 移弃上清，注意不要触及管底的 DNA 沉淀。再短暂离心数秒, 移弃残留液体 （残留的乙醇会影响后续反应）。如果此时离心面的管壁上有可见的膜状沉淀， 属于正常现象（常见于血清血浆样品）。加入 20uL 核酸样品稀释液，用移液 枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不 溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有 DNA，必 须取混合液使用（哪怕很浑浊）。

6. 样品可以直接取适量用于 PCR，也可保存于-20℃长期保存。 注：病毒提取的核酸量远不足以电泳检测，提取后可通过  PCR 检测，最终灵 敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。

使用效果

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。