柱式骨骼DNA提取试剂盒（柱式骨骼DNAout）

产品及特点 本产品是专门用于从动物骨骼（包括骨粉）样品中提取 DNA 的产品，20 次规格足够 50 次微量提取。它具有下列特点：

1. 微量提取，一次可以处理 300 mg 左右的骨骼（但需要先将骨粉变成骨 粉）。

2. 柱式操作，方法简单，整个过程只需要 40-60 分钟。

3. 得到的 DNA 分子量不均匀，一般在 20 Kb 到 100 bp 之间，具体取决 于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。

4. 得到的 DNA 可以直接用于 PCR 或荧光 PCR 反应。

规格及成分

运输及保存 常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂 氯仿

使用方法

1. 骨粉的制备：用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染物对后续 PCR 的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、 商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一步。

2. 用天平称取 0.2 克骨粉，转移到 2 mL 塑料离心管中。

3. 加入 1 mL 溶液 A 到骨粉中，充分振荡 30 秒混匀。（注意：溶液 A 在 4℃ 放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充 分摇匀后再取用，且骨粉加到溶液 A 中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。）

4. 65℃水浴放置 30 分钟。

5. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自备氯仿，充分振荡 30 秒混匀。

6. 12,000 rpm 室温离心 3 分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心 管中。

7. 加入 0.5 mL 溶液 C，颠倒混匀。

8. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要 12,000 rpm 室 温离心 1 分钟，并弃收集管中的穿透液。

9. 加入 0.5 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心 1 分钟， 弃收集管中穿透液。

10.再加入 0.5 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心 1 分 钟，弃收集管中穿透液。

11.12,000 rpm 室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要， 否则残留的液体会抑制后续的 PCR。

12.将离心吸附柱套入到一个自备的干净的 1.5 mL 塑料离心管中，在离心吸 附柱的滤膜的中部加入 30 uL DNA 洗脱液，然后室温放置 2 分钟。如果 先将 DNA 洗脱液预热到 60-80℃再使用，效果更佳。

13.12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟，离心管中收集的样品即为骨骼 DNA。

14.取少量进行电泳检测。注意：一般 DNA 都呈现弥散状，分布在 20 Kb 到 100 bp 这一广泛的范围，其比例跟骨骼（或骨粉）的新鲜程度、加工过 程（对骨粉）等因素密切相关。

15. DNA 样品可以直接用于 PCR，也可放-20℃长期保存

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。