柱式毛发DNA提取试剂盒（柱式毛发DNAout）

产品及特点 动物毛发不容易降解，同时含有大量的线粒体，所以是考古研究、法医研究和 线粒体研究等领域的重要性实验材料。目前市场上专门用于毛发样品 DNA 提取的 产品很少，为此开发了本产品，它具有下列特点：

1. 充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合，前者使 DNA 充分释放，后者使杂 质充分被去除。

2. DNA 回收率一般在 0.5 ug/100 mg 左右（理论产率一般是 0.1-1.5 ug 之间）。

3. DNA 纯度高，OD 比值一般在 1.6-1.8 之间。

4. 提取的 DNA 能够用于电泳、酶切、杂交检测和 PCR。

5. 适合于动物的各种毛发。

规格及成分

运输及保存 常温运输及保存（其中蛋白酶 K 溶液需要低温运输，-20℃保存。），有效期一 年。

自备试剂 β-巯基乙醇、氯仿

使用方法

1. 将 30-50 mg 左右毛发充分剪碎（成芝麻大小就可以），最后转移到一个干净 的 1.5 mL 塑料离心管中。注意：最好从靠近根部的地方剪取样品。

2. 加入 1 mL 柱式毛发 DNAout 溶液 A（使用之前需取本次实验所需的溶液 A 现加入自备的β-巯基乙醇，β-巯基乙醇的终浓度为 5%）和 20 uL 蛋白酶 K 溶液（10 mg/mL），37℃保温 10 小时（一般过夜保温就可以）。注意：最好 让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让毛发溶化。

3. 加入 0.3 mL 的柱式毛发 DNAout 溶液 B 和 0.2 mL 的自备氯仿，振荡器上 振荡 30 秒充分混匀。

4. 12,000 rpm 室温离心 3 分钟，小心将上清转移到新的 1.5 mL 塑料离心管中。

5. 在上清液中加入等体积的柱式毛发 DNAout 溶液 C，上下颠倒 30 秒充分混匀。 6. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将 0.7-0.8 mL 混合液转移到 离心吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000 rpm 室温 1 分钟，弃穿透液。再把 剩余的一半上柱，重复此操作。

7. 将 0.7 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心半分钟， 弃穿透液。

8. 将 0.3 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 离心半分钟（此步 为第二次洗涤，一般可以省略）。

9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。

10. 将离心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 30 uL DNA 洗脱液 3.0。

11. 12,000 rpm 离心 1 分钟，管底即为毛发 DNA 溶液，可立即用于 PCR，也可 长期保存在－20℃。注意：由于头发中 DNA 的含量十分少，所以电泳检测时 即使全部上样也只能看见十分微弱的 DNA 条带。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。