即用型易错PCR试剂盒
产品及特点 易错 PCR 是在采用 DNA 聚合酶进行目的基因扩增时,通过调整反应条件来改变扩增 过程中的突变频率, 从而以一定的频率向目的基因中随机引入突变,获得蛋白质分子的随 机突变体。其关键在于对合适突变频率的选择,突变频率太高会导致绝大多数突变为有害 突变, 无法筛选到有益突变; 突变频率太低则会导致文库中全是野生型群体。本产品基于 以上原理研制。它具有下列特点:
1. 操作简便;
2. 突变没有趋向性, 突变率稳定, 突变率为 0.66%;
3. 本产品只适用于扩增 1kb 以下的产物,对于 1kb 以上的产物,建议分段扩增。
4. 可用于连续易错 PCR(sequential error-prone PCR)。
规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存, 保存期限为 12 个月。
使用方法
1. 易错 PCR 体系
推荐反应体系(30 μl)
2. 易错 PCR 程序
按用户已经优化的 PCR 条件进行一定循环数的 PCR ,如果没有优化的PCR 条件,可先尝试下面的 PCR 程序。
3. 结果检测:反应结束后取 5 μl 反应产物,加入适量上样缓冲液,然后进行琼脂糖凝 胶电泳,检测是否得到预期片段大小的 PCR 产物。
4. 胶回收易错 PCR 扩增产物、克隆并对单菌落进行功能筛选或测序分析、如果需要增 加突变率,可以突变后的 DNA 为模板,进行连续易错 PCR。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。