即用型高保真PCR试剂盒
产品及特点 本产品是即用型的 2×高保真 PCR 预配反应液,含有除引物、模板以外的所有PCR 试剂,包括 Pfu DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等,特别适合于高保真 PCR 反应。
1. Pfu DNA 聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通 Taq 酶的 10 倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到 1 倍浓度即可进行 PCR 反应,非常方便,简化了 PCR 的准备工作。
3. PCR 反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
4. 本产品含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
6. 适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的 PCR 产物可用于平末端克隆。
规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。
自备试剂 模板和引物。
使用方法 将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30 uL 反应体系)加入 PCR 管中即可进行 PCR,反应结束后直接取 5-15 uL 电泳检查扩增结果。如果反应体系不是 30 uL,各成分需要按比例增加或减少。
放入 PCR 仪中进行 PCR。由于含有电泳示踪剂(注意:不是溴化乙锭等 DNA染料),故 PCR 结束后可以取 5-10 uL 直接上样电泳, 红色染料电泳速度相当于 50bp DNA 片段。
参考扩增条件:
注意:
1. 本产品的 Pfu DNA 聚合酶比 Taq DNA 聚合酶的延伸反应速率低,因此我 们推荐的扩增延伸反应时间为每 kb 需 2 分种。
2. Pfu 酶 3’-5’外切酶活性可降解引物,所以强烈建议在冰上配置完成 PCR 反应液后,立即放入 PCR 仪中进行扩增,扩增完毕后立即进行电泳检测。
3. 本产品扩增产物为平末端,不可以直接进行 TA 克隆,可以使用克必隆 B 载体进行克隆。如需要进行 TA 克隆,建议对 PCR 产物纯化后, 用加 A 试剂盒加 A 后再进行 TA 克隆。
4. 由于 Pfu 无 5’到 3’外切酶的活性,所以本试剂盒不能用于实时荧光 PCR 。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。