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污染的细胞该如何拯救?-【信裕生物】

细胞污染想必是科研实验员在日常研究时,经常遇到的问题,所以,这对于科研实验员来讲,真的是一件非常糟糕的事情。当然,细胞污染之后,我们也不要着急,我们应该冷静分析是哪一个操作步骤出现了问题?因为造成细胞污染的原因有很多,比如:操作不当、操作环境脏乱、培养箱污染等原因,并且不同的原因污染后的现象也会有所差异,下面进入正题,一般细胞污染大概分为细菌污染、真菌污染、支原体污染还有说法不一的黑胶虫污染等。每种污染的特征都很明显,因为微生物种类实在太多,所以我就选取比较典型和常见的污染讲下。


常见的污染

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一、细菌污染:


容易观察,培液会变黄,而且是浑浊的黄色,镜下观察不到正常细胞形态,镜下遍布细沙样的黑点。细菌污染一定要及时查找原因,如果换液的细胞全部污染,就要怀疑是不是培养液污染,或者使用的器械污染。


二、霉菌污染

培液不变浑浊但是会变黄,一般肉眼可见培养液中有团块的霉菌菌落,镜下呈细丝竹节管状,有菌丝结构。霉菌梅雨季节多见,一般霉菌污染及时扔掉,彻底清洁培养箱


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三、白色念珠菌污染

培液颜色没有明显改变,污染严重会变黄,但是是澄清的黄不变浑浊,镜下观察到好多像球形的亮点,多的话会聚集成葡萄串样。白色念珠菌污染不要抢救立马扔了,救也救不好,而且白色念珠菌会互相通过孢子传染。


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四、杆菌污染

镜下看到许多杆状的细菌,培液颜色没有明显改变。


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五、支原体污染

支原体污染很隐蔽,主要表现为细胞在生长速度变慢,细胞状态形态改变,而且不断死亡,镜下没啥改变,有时可见许多黑色的细胞碎片。检测支原体污染可以使用支原体检测试剂盒进行检测,现在市面上抗支原体的药很多,效果也都可以。不确定是不是支原体污染可以使用支原体药试一下,如果细胞状态明显改善,有可能就是支原体污染。


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、黑胶虫污染

现在主流认为黑胶虫是血清的问题,可以从新换一批次血清试一下。

抗生素

遇到以上情况最佳处理方式是将细胞高温灭菌后丢弃,将使用的超净台,移液枪,耗材,培养箱清洁消毒。但是大家辛苦构建的细胞遇到污染,就这样丢掉,也不甘心呀,因为养细胞也花费了自己的精力和时间,面对这样的问题,当然也有一些办法可以拯救,可以尝试使用抗生素拯救被污染的细胞,下面可参考针对不同污染有相对应抗生素可以治疗:

抗生素

应用范围

青霉素

革兰氏阳性菌

链霉素

革兰氏阳性菌, 革兰氏阴性菌

庆大霉素

革兰氏阳性菌, 革兰氏阴性菌, 支原体

两性霉素B

革兰氏阳性菌,酵母菌, 真菌

制霉菌素

酵母菌, 真菌

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tips

细胞污染起因有很多,最为主要的原因还是在个人的操作方法不符合规范导致,比如说:超净台里的灭菌枪头被污染或者是双手没杀菌消毒,又或者是操作期间触碰到培养瓶口或是在培养皿上挥过导致灰尘细菌掉落,而后才是培养环境不佳,培养箱水盆未定时清洁擦拭,培养基、缓冲液未适当封口保存等。

所以,归根到底,为了防止细胞污染,其实有些时候预防比治疗更加重要,在操作的时候一定要注意防止污染的操作。


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